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凝膠色譜系統(tǒng)是一種用于純化生物分子的高效技術(shù)
點(diǎn)擊次數(shù):636 發(fā)布時(shí)間:2023-04-22
凝膠色譜系統(tǒng)是一種用于純化生物分子的高效技術(shù)。這種技術(shù)主要是通過分離材料的孔徑大小來分離生物分子的不同分子量的物質(zhì)的一種方法。
凝膠色譜系統(tǒng)可以用于從復(fù)雜的混合物中純化出一種目標(biāo)分子。凝膠色譜系統(tǒng)的基本原理是利用凝膠(通常為聚丙烯酰胺或瓊脂糖等)來填充色譜柱。凝膠中有不同大小的孔,孔徑大小與凝膠的性質(zhì)有關(guān)。目標(biāo)分子在凝膠中移動(dòng)時(shí),會(huì)受到孔徑大小的限制而被分離出來。如果目標(biāo)分子的分子量較小,則會(huì)沿著凝膠孔徑大的方向運(yùn)動(dòng),如果目標(biāo)分子的分子量較大,則會(huì)向孔徑小的方向移動(dòng)。
凝膠色譜系統(tǒng)主要有兩種類型:尺寸排阻色譜(SEC)和離子交換色譜(IEC)。尺寸排阻色譜利用成對(duì)交聯(lián)的高分子凝膠來排除分子尺寸相對(duì)較大的物質(zhì),相對(duì)較小的物質(zhì)則會(huì)被保留在凝膠中。離子交換色譜則是通過與凝膠表面上負(fù)電荷離子相互作用來分離帶電分子。在離子交換色譜中,分子可以在凝膠中進(jìn)行分離,具體分離取決于酸堿性質(zhì)。凝膠色譜系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)是可以從復(fù)雜的混合物中快速、高效地分離出目標(biāo)分子,且不會(huì)對(duì)目標(biāo)分子產(chǎn)生嚴(yán)重的損傷。
凝膠色譜系統(tǒng)還可以與其他技術(shù)(如聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、電泳)結(jié)合使用,以實(shí)現(xiàn)更高靈敏度和精確度。最后,需要指出的是,凝膠色譜系統(tǒng)還有一些局限性,如分離效果受到分子的極性和電性質(zhì)、分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)的影響。
由于凝膠色譜系統(tǒng)在分離過程中需要涉及對(duì)比色譜柱的各種參數(shù)(如孔徑大小、表面電性等),因此對(duì)于非專業(yè)人士使用較為困難,需要一定的專業(yè)知識(shí)和技能才能正確操作。